Dioxyde de chlore : Remède contre Covid 19 ? (Traduit de l'anglais / Technique)

Souffle de Vie Jeu 5 Mai - 23:11

Annals of Pharmacology and Pharmaceutics
Remedy Publications LLC. 2021 | Volume 6 | Numéro 1 | Article 11991L’introduction
de la maladie à coronavirus 2019 (COVID-19) est causée par le coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère (SARS-CoV-2) et est devenue un grave problème de santé depuis son apparition fin 2019
[1,2]. L’épidémie de cette maladie est originaire de Wuhan, dans la province du Hubei, en Chine, avant de se propager rapidement dans le monde entier [2]. La pandémie de COVID-19 a été déclarée urgence internationale
en 2020 [3]. En mai 2021, le nombre mondial de décès dus à la COVID-19 est estimé à
environ 3,3 millions [4]. Le SARS-CoV-2 est un virus enveloppé et possède un génome d’ARN monocaténaire à sens négatif de 29,9 kilobases [5]. Le virus attache à la surface de la cellule hôte des pneumocytes de type I et II, des cellules endothéliales et des cellules épithéliales bronchiques ciliées [6]. Bien que plusieurs vaccins contre la maladie aient déjà été développés et administrés [7], la pandémie n’est pas encore terminée. En outre, des types variants du virus SARS-CoV-2 ont été signalés en Angleterre (variante B.1.1.7) et en Afrique du Sud (variante B.1.351) qui semblent se propager plus facilement que le virus d’origine [8]. Ces deux variantes portent une mutation commune (N501Y) dans le domaine de liaison aux récepteurs (RBD) de la protéine de pointe (protéine S) [5]. Cette mutation est importante dans la liaison de la protéine spike au récepteur de surface des cellules humaines, l’enzyme de conversion de l’angiotensine 2
(ACE2), une glycoprotéine transmembranaire de type I ayant une activité carboxypeptidase [5].
Pour contrôler la propagation de la COVID-19, il est essentiel de développer et de déployer des désinfectants sûrs mais efficaces contre le virus parallèlement à de nouveaux médicaments antiviraux et vaccins [8]. Bien que l’éthanol soit connu pour être efficace contre le virus [9], il ne peut pas éradiquer le virus présent dans l’air. Le
dioxyde de chlore (ClO2) (CD) est un gaz jaune soluble dans l’eau à température ambiante et un radical libre stable [10]. La MC peut être utilisée comme gaz ou solution aqueuse pour inactiver à la fois les virus et les bactéries [11-15].
La puissante action désinfectionnelle de la MC contre les microbes est due à sa forte activité oxydante contre les protéines [16]. De plus, des concentrations sûres et admissibles de MC ont été bien documentées Inhibition de la liaison de variantes de la protéine de pointe du coronavirus SARS-CoV-2 à un récepteur humain par le dioxyde de chlore OPEN ACCESS
*Correspondance:
Norio Ogata, Département de R & D,
Taiko Pharmaceutical Co., Ltd., 1-2-1
Hikaridai, Seikacho, 619-0237 Kyoto,
Japon, Tel: 81 774 98 2716; Télécopieur : 81
774 98 2737;
Courriel : nogata7@yahoo.co.jp
Date de réception : 21 mai 2021
Date d’acceptation : 16 juin 2021
Date de publication : 18 juin 2021
Citation :
Ogata N, Miura T. Inhibition de la
liaison de variantes de la protéine de pointe du coronavirus SARS-CoV-2
à un récepteur humain par le dioxyde de chlore. Ann
Pharmacol Pharm. 2021; 6(1): 1199.
Droits d’auteur

2021 Norio Ogata. Il s’agit
d’un article en libre accès distribué sous
la licence Creative Commons Attribution , qui permet une utilisation, une distribution et une reproduction sans restriction sur n’importe quel support, à condition que l’œuvre originale soit correctement citée.
Article de recherche
publié: 18 jun, 2021
Résumé
Objectif: COVID-19 causé par un nouveau coronavirus, le SARS-CoV-2, est devenu une pandémie mondiale en cours. Un système de désinfection virucide sûr et puissant est nécessaire de toute urgence pour protéger la population contre le virus. Le dioxyde de chlore (ClO2) est un désinfectant puissant connu pour inactiver à la fois les
virus et les bactéries. L’objectif de cette étude était d’étudier si le dioxyde de chlore inhibe la liaison du domaine de liaison aux récepteurs de la protéine Spike (protéine S) de la variante du coronavirus (variantes britannique et sud-africaine) au récepteur humain, l’enzyme de conversion de l’angiotensine 2 (ACE2).
Matériaux et méthodes: Des expériences in vitro visant à déterminer la liaison du domaine purifié de liaison des récepteurs de la protéine spike à ACE2 ont été réalisées en présence de diverses concentrations de dioxyde de chlore. Des protéines de pointe purifiées des variantes britannique et sud-africaine ont été utilisées.
La protéine Spike enduite sur une plaque de microtitrage a été traitée avec une solution aqueuse de dioxyde de chlore ou une solution de pulvérisation de dioxyde de chlore.
Résultat : La liaison des protéines de pointe variantes a été inhibée de manière dépendante de la concentration (concentration inhibitrice de 50 % (CI50) de 7,6 μmol/L et de 5,8 μmol/L pour les variantes britannique et sud-africaine , respectivement).
Conclusion : Ces résultats montrent que la solution aqueuse de dioxyde de chlore peut inactiver la liaison des protéines de pointe variant à la protéine réceptrice ACE2 humaine, ce qui indique que cette stratégie peut être utile pour bloquer la transmission des variants du virus SARS-CoV-2.
Mots-clés : Dioxyde de chlore; COVID-19; SARS-CoV-2; Virus; Désinfection; IC50
Norio Ogata* et Takanori Miura Department of R&D, Taiko Pharmaceutical Co., Ltd, Japan
Norio Ogata, et al., Annals of Pharmacology and Pharmaceutics
2Remedy Publications LLC. 2021 | Volume 6 | Numéro 1 | Article 1199
[17]. Ici, nous démontrons que les solutions aqueuses CD peuvent inactiver
la liaison des protéines de pointe de la variante britannique et sud-africaine
à l’ACE2 humain dans des expériences in vitro, suggérant qu’elle pourrait être
efficace pour inhiber l’infection par le virus SARS-CoV-2.
Matériaux et méthodes Produits chimiques CD, préparés dans notre laboratoire comme décrit précédemment [16], ont été dissous dans de l’eau purifiée et stockés à 4 ° C dans une bouteille d’ambre bien bouchée . Le CD stock a été dilué dans de l’eau purifiée à la concentration souhaitée immédiatement avant utilisation. Une solution de pulvérisation de CD disponible dans le commerce et vendue sous la marque Cleverin (Taiko
Pharmaceutical, Osaka, Japon) a également été testée. La composition de
Cleverin était de 1,48 mmol/L CD, 66,34 mmol/L de chlorite de sodium, 8,70
mmol/L de dihydrogénophosphates de sodium, 0,24 % (poids/poids)
de monolaurate de décalycérol, 0,06 % de silicone et 98,97 % d’eau, pH
6,01. Une bouteille hermétiquement bouchée de la solution de pulvérisation fabriquée il y a 3 ans, conservée à température ambiante et protégée de la lumière a été utilisée. La
concentration de CD de la solution pulvérisée au moment de l’expérience était de
1,80 mmol/L (121 ppm (poids/poids)). La solution pulvérisée a été diluée au besoin avec de l’eau purifiée immédiatement avant l’expérience .
Test de liaison
Le kit de dosage de liaison aux protéines de pointe a été acheté auprès de BPS
Bioscience (San Diego, Californie, États-Unis). Les codes de kit pour les
variantes britanniques et sud-africaines étaient 78140 et 78151, respectivement.
Les kits consistaient en un domaine de liaison aux récepteurs (RBD) purifié de
protéines de pointe dérivées du virus variant correspondant. Le kit
a été utilisé comme recommandé par le fabricant avec quelques
modifications. La protéine de pointe RBD fournie dans le kit a d’abord été
recouverte d’une plaque de microtitrage de 96 puits du kit, comme indiqué dans le
manuel. Une aliquote de 50 μL de solution de pulvérisation de CD ou de CD diluée à une
concentration appropriée a été placée dans chaque puits et incubée à
25ºC pendant 5 min. Ensuite, une aliquote de 20 μL de thiosulfate de sodium de 10 mmol/L dans le tampon bloquant 2 fourni dans le kit a été ajoutée à chaque puits pour
mettre fin à la réaction de la MC avec la protéine. Dans cette condition,
la MC est rapidement convertie en ClO2- et devient non réactive avec les
protéines [16]. Ensuite, une aliquote de 35 μL d’ACE2 marqué à la biotine diluée à
1,5 μg/mL par blocking buffer 2 a été ajoutée à chaque puits. L’ACE2 marquée à la biotine
a ensuite été liée à la peroxydase de raifort marquée à la streptavidine
et détectée à l’aide d’un substrat de la peroxydase de raifort fournie
dans le kit. Le signal de chimiluminescence a été mesuré après 1 min
à l’aide d’un luminomètre (modèle SH-9000; Corona Electric, Hitachinaka,
Ibaraki, Japon). Chaque concentration de MC a été analysée dans quatre puits
(n = 4). Étant donné que l’intensité de la chimiluminescence fluctuait d’une
expérience à l’autre, les données finales ont été normalisées (c.-à-d. 0 μg/ml de MC à 100 %).
Résultats et discussion
Comme le montre la figure 1, l’intensité de la liaison de la protéine ACE2 humaine à la protéine de pointe RBD a diminué avec l’augmentation
des concentrations de MC. La concentration de solution aqueuse de MC
requise pour donner une inhibition de liaison de 50 % (CI50) était de 7,6 μmol/L et
de 5,8 μmol/L pour les variantes britannique et sud-africaine, respectivement
(tableau 1). Un effet inhibiteur de la MC a également été observé à l’aide de la
solution de pulvérisation de LA MC (Figure 2). Plus précisément, la CI50 pour la liaison de l’ACE2 à la protéine de pointe RBD était de 15,3 μmol/L et de 4,7 μmol/L pour la
variante britannique et sud-africaine, respectivement (tableau 1). De plus,
la liaison de la protéine de pointe de la souche de Wuhan RBD à ACE2 a également été
inhibée par la solution aqueuse CD avec une CI50 de 6,5 μmol / L
(Ogata N, données non publiées). Il y avait de légères différences dans
l’effet inhibiteur entre la MC aqueuse et la solution de pulvérisation de CD
dans ces expériences. Les différences observées peuvent être dues à
l’effet d’autres constituants dans la solution de pulvérisation, qui sont ajoutés pour
prolonger la durée de conservation du produit. Ces résultats suggèrent que toutes les solutions DE MC sont efficaces pour inactiver la liaison du virus SARS-CoV-2
au récepteur des cellules humaines ACE2. En tant que tel, la MC est susceptible d’avoir une action inhibitrice sur l’infection du virus.
La protéine de pointe RBD du virus SARS-CoV-2 est située dans la S1
Figure 1: Effets de la solution aqueuse de dioxyde de chlore (CD) sur la liaison
du domaine de liaison aux récepteurs (RBD) des variantes de la protéine de pointe du virus SARS-CoV-2 à l’enzyme de conversion de l’angiotensine humaine 2 (ACE2) dans
des expériences in vitro. La liaison de la protéine de pointe de la variante britannique (cercles remplis) et de la variante sud-africaine (cercles ouverts) à ACE2 est montrée. Chaque point représente une moyenne ± écart-type de quatre expériences (n = 4).
Figure 2 : Effets de la solution pulvérisée de dioxyde de chlore (CD) sur la liaison
du domaine de liaison aux récepteurs (RBD) des variantes de la protéine de pointe du virus SARS-CoV-2 à l’enzyme de conversion de l’angiotensine 2 humaine (ACE2) dans
des expériences in vitro. La liaison de la protéine de pointe de la variante britannique (cercles remplis) et de la variante sud-africaine (cercles ouverts) à ACE2 est montrée. Chaque point représente une moyenne ± écart-type de quatre expériences (n = 4).
Ic50 (μmol/L) SOLUTION AQUEUSE CD contre
la variante britannique 7.6
Variante sud-africaine 5.8
Solution pulvérisée CD contre
la variante britannique 15.3
Variante sud-africaine 4.7
Tableau 1 : La concentration de dioxyde de chlore (CD) solution aqueuse nécessaire
pour inhiber la liaison du domaine de liaison aux récepteurs de la variante SARS-CoV-2 spike protéines (protéines S) à la protéine réceptrice humaine ACE2 de 50% (IC50) est indiquée.
Des variantes du domaine de liaison aux récepteurs (RBD) de la protéine de pointe ont été traitées avec une solution aqueuse de dioxyde de chlore (CD) ou une solution de pulvérisation de CD à diverses concentrations, puis testées pour sa capacité de liaison à la protéine réceptrice ACE2
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de la protéine de pointe et la région de RBD qui interagit avec l’ACE2 sont constituées d’une petite parcelle de 25 résidus d’acides aminés [18].
Les résidus d’asparagine 501 (N501), qui sont mutés en tyrosine
dans les deux variantes virales, font partie de la région du patch RBD de la
protéine spike [5]. On pense que la mutation N501Y entraîne une transmissibilité virale accrue en augmentant l’affinité de liaison à l’ACE2 humain
[18]. De plus, il convient de noter que cette mutation permet
au virus de s’échapper de nombreux anticorps élevés contre le virus [18],
ce qui suggère une faible efficacité des vaccins contre ces souches variantes
du virus SARS-CoV-2. Nous avons précédemment démontré que la liaison
de la protéine de pointe RBD de la souche wuhan à l’ACE2 humain est
inhibée par une solution aqueuse DE MC [19]. Ces résultats suggèrent que la MC
pourrait être utile comme désinfectant contre les virus. Bien que le mécanisme
de cette inhibition n’ait pas été élucidé, nous avons émis l’hypothèse qu’il pourrait
impliquer l’oxydation du résidu de tyrosine 453 du RBD de la
protéine spike, qui forme une liaison hydrogène avec ACE2 [19]. En effet,
la MC est connue pour oxyder les résidus de tyrosine dans les protéines [16]. Étant donné
que l’asparagine 501 est mutée en tyrosine (Y) dans les souches variantes,
le traitement du virus par la MC peut également oxyder le 501Y. Étant donné que
les vaccins semblent avoir une efficacité réduite contre les
virus variants, les systèmes de désinfection utilisant la MC peuvent être inestimables. Il
est également important de noter que la MC est un gaz à température ambiante et
peut être utilisée sous cette forme pour inactiver les microbes flottant dans l’air à des
concentrations jugées sans danger pour la santé humaine [17]. En tant que tel, la MC gazeuse pourrait être utilisée pour inactiver le virus SARS-CoV-2 flottant dans
l’air d’une pièce bondée.
Conclusion La solution CD, que ce soit dans l’eau ou sous forme de solution de pulvérisation formulée dans l’eau, s’est avérée inhiber puissamment la liaison de la protéine de pointe RBD à la protéine réceptrice humaine ACE2 d’une manière dépendante de la concentration. Ces résultats suggèrent que la MC pourrait être inestimable pour inhiber l’infection du virus SARS-CoV-2 chez l’homme.
Remerciements
Les auteurs sont des employés de Taiko Pharmaceutical Co., Ltd. Ce
travail a été soutenu par l’entreprise.
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Traduit en français de / Source : http://www.remedypublications.com/open-access/inhibition-of-the-binding-of-variants-of-sars-cov-2-coronavirus-spike-7364.pdf